清康熙八年（1669）由乐尊在北京创办，其制售的成分由于配方严谨，用料讲究，深受大众信赖，同时也博得达官贵人及*的青睐。民国十七年（1928年）明国从北京迁至南京，乐氏家族第十三代嫡传乐笃周受家族的委派，在南京减分号，1929年，北京同仁堂乐家老铺南京分号（旧称南京同仁堂）经国民社会局批准正式开业，创办后的南京同仁堂，其生产工艺，技术，质量标准和经营管理均与北京同仁堂一脉相承，后几经改制，重组，才有了现在南，北同仁堂的格局。
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